هنحكي هنا عن الفحص الثاني اللي بيشيك على الـ
Hepatocellular injury هل خلايا الكبد فيها damage
ولا لأ، الإنزيم الآخر، الـ ALT (Alanine
Aminotransferase)، إنزيم له نشاط إنزيمي
مشابه لـ AST، شغله يا جماعة نفس شغل الـ
AST، إيه شغلهم؟ ينقل أمين جروب (مجموعة أمين) من مكان
لمكان آخر، تمام؟ هذا الـ ALT (Converts) يحول الألانين
والألفا كيتو جلو تاريت إلى مادة البيروفات
والجلوتامات، زي ما أنتم شايفين، هي الـ Amino Acid
الحمض الأميني، الألانين مع ألفا كيتو جلو تاريت في
وجود الـ ALT إنزيم، إيش بيعمل؟ بنزع الـ Amino
Group الموجودة في الحمض الأميني الألانين وبياخدها
وبينقلها على المركب الآخر، الـ α- كيتو جلو تاريت
محصلة النقل أن الألانين هيتحول لـ Pyruvate والـ
α-كيتو جلو تاريت هذه المادة هتتحول لـ Glutamate
طبعًا مش هطلب منكم المعادلة وفي التحويل، بس للعلم ول
للفهم، الـ Clinical Significance للفحص، الأهمية
التشخيصية لفحص الـ ALT، it is found in the kidneys,
heart and skeletal muscle tissue, but primarily in
the liver tissue، بيحكي لي إنزيم الـ ALT، وين
الأماكن اللي بيكون موجود فيها بشكل أساسي، موجود في
الكبد، والقلب، والعضلات الهيكلية، و RBCs، أضيف كمان
الـ Red Blood Cells (خلايا الدم الحمراء)، موجود في هذه
الأماكن يا جماعة، بتركيز قليل جدًا، لا يُذكر، تمام؟
لكنه موجود بـ primarily، ولكن بشكل أساسي، الـ ALT
موجود في خلايا الكبد، إذا الـ ALT موجود في الـ
kidney، والـ heart، والـ skeletal muscle، والـ RBCs
بكميات قليلة جدًا، لكن في ال liver tissue موجود بـ
high concentration (بتركيز عالي)، تمام، في الدم، في الـ
serum، زي زي الـ AST، الـ ALT موجود بتركيز قليل جدًا
في الإنسان الطبيعي، الـ ALT يكون موجود في الـ serum
ولكن بتركيز قليل، لكن وين موجود أكثر شيء في الـ
tissue، في الأنسجة، تمام؟ وبشكل أساسي في الكبد، الـ
test is used mainly in the diagnosis of liver
disease and to monitor the effects of hepatotoxic
drugs، الفحص بينعمل بشكل أساسي، فحص الـ ALT، عشان نشخص
مشاكل الكبد، وخاصة المشاكل اللي بتصيب الخلايا،
تمام؟ وأيضًا عشان نتابع تأثير الأدوية السامة على
الكبد، أحيانًا في الـ Drugs، ممكن بعض الأدوية تؤثر
على الكبد، تمام؟ وتؤثر على خلايا الكبد، وتعمل injury
فيها، فإحنا من خلال فحص الـ ALT بنتابع هذه الأدوية
تمام؟ often higher than AST with liver damage and
tend to remain elevated longer، هنا بيحكي لي الـ ALT
عادة تركيزه أعلى من الـ AST في حالات liver damage
يعني لو صار عندي مشكلة في الكبد (liver damage)، الـ
AST والـ ALT، الإثنين موجودين في الكبد، تمام؟ بس
مين موجود أكثر في الكبد؟ الـ ALT، الـ ALT موجود في
الكبد بتركيز عالي كثير، أعلى من الـ AST، فلما بيصير
عندي مشكلة في الكبد، هيطلع الـ ALT والـ AST للخارج،
على الدم، تمام؟ وبالتالي الـ ALT والـ AST الإثنين
هيزيدوا في الدم، بس الـ ALT هيزيد أكثر من الـ AST
لأنه أصلًا هو تركيزه في الـ liver أكثر وأعلى
وبالتالي لما يطلعوا الإثنين على الدم، الـ ALT والـ
AST بيزيدوا، بس الـ ALT بيكون أعلى من الـ AST، تمام؟
أيضًا كمان شغلة، إذًا كمان شغلة ثانية بدنا نعرفها أنه
غير أن الـ ALT بيكون أعلى من الـ AST في حالات
liver damage، كمان الـ ALT بيظل عالي في الدم
لفترة أطول من الـ AST، حكينا أنه يعني more liver
يعني كمان شغلة ثانية، more liver specific than AST
إذاً في ثلاث شغلات بدنا نأخذها بعين الاعتبار، الـ ALT
في الكبد تركيزه أعلى من الـ AST، فلما بيصير liver
damage، الإثنين بيطلعوا على الدم، لكن في الدم الـ ALT
هيكون تركيزه أعلى من الـ AST، ومش بس هيك، كمان الـ ALT
بيظل عالي لفترة طويلة، أطول من الـ AST، يعني ممكن
بعد خمس، ست أيام، الـ AST يرجع طبيعي، ويظل الـ ALT
عالي في الـ Serum، تمام، شغلة ثالثة بيحكي لنا أن الـ
ALT يعتبر متخصص أكثر من الـ AST، متخصص للكبد، فحص
الـ ALT متخصص أكثر في الكبد من فحص الـ AST، تفاجأنا أن
الـ AST مش متخصص، بيرتفع في حالات النوبة القلبية، بيرتفع
في حالات مشاكل الكبد، لكن الـ ALT بقول لك remains
normal in acute myocardial infarction (يبقى طبيعي
في حالات النوبة القلبية)، إذن هو متخصص أكثر شيء للكبد
ليش يا جماعة، مع أنه هتسألوني، هتحكوا لي طيب الـ ALT
هو موجود في القلب، حكيناه، وفي الـ kidney، طيب ليش
في حالات النوبة القلبية ما بيزيد؟ لأنه حكيت لكم هو
موجود في الـ kidney، والـ heart، والـ skeletal
muscle، والـ RBCs بكميات قليلة جدًا، مش زي الـ AST،
الـ AST موجود في هذه الأنسجة بكميات أكبر، وبالتالي
الـ ALT موجود في عضلة القلب، ولكن بكميات قليلة، يعني
لما بيصير دمج في القلب ويطلع الـ ALT على الـ
Serum، على الدم، مش كثير هيزيد تركيزه أو هيفرق
معاه، تمام؟ وبالتالي بيظل ضمن الـ Normal Range،
إذاً فحص الـ ALT متخصص أكثر من فحص الـ AST للكبد
الـ Specimen Collection (نوع العينة)، زي الـ AST، سيرم
أو بلازما، البلازما، نوع الـ Anticoagulant، EDTA أو
هيبارين، تمام؟ لأنه كمان الـ ALT موجود جوا الـ RBCs
يعني بدي أتجنب أجمع عينة Hemolyzed، والعينة الـ
Hemolyzed بدي أعملها rejection (أرفضها)، ليش؟ لأنه لو
العينة صار لها Hemolysis، هيطلع الـ ALT من الـ RBCs
على السيرم، يزيد تركيزه في الـ Serum بشكل خاطئ
معلومة أن الـ ALT موجود بالـ RBCs تقريبًا بـ 5
أضعاف الـ ALT اللي موجود في الـ Serum، يعني هو
موجود في الـ RBCs، ولكن بـ 5 أضعاف، تمام؟ لو بتتذكروا
الـ AST، موجود، الـ AST في الـ RBCs بـ 15 ضعف، يعني
الـ AST موجود في الـ RBCs بكميات أكبر من الـ ALT
تمام؟ هذه معلومة مهمة، الـ AST موجود في الـ RBCs
بكميات أكبر من الـ ALT، الـ "Say for enzyme
activity"، قياس الـ activity تبع الإنزيم، الطرق
المستخدمة في قياس الـ activity تبع إنزيم الـ ALT
طبعًا الطريقة ومبدأ الشغل نفس مبدأ شغل الـ AST، مش
هي إنزيمات، كلها نفس المبدأ، الكلام المكتوب بالـ
slide، تلخيصه في المربع اللي تحت، الأبيض، هذا الـ
principle (مبدأ الفحص)، نفس الـ AST بالظبط يا جماعة
الـ Serum تبع المريض بيكون فيه الـ ALT، الـ
enzyme اللي أنا بدي أحسب الـ activity تبعته، بدي
أحسب نشاطه، لأنه نشاطه هيعبر عن الـ concentration
لهذا الـ enzyme، تمام؟ هلجيت؟ الألانين والألفا
كيتو جلو تاريت، هذه substrate موجودة في الـ reagent، هل
جات الألانين، حكيناه، والـ Alpha-ketoglutarate
substrate، هذه المواد موجودة في الـ Reagent، لما نخلط
الـ Reagent على عينة المريض، على السيرم، الـ ALT
الموجود في السيرم هيشتغل على الـ substrate اللي
موجودة في الـ Reagent، ويحول الألانين لـ Pyruvate
والـ Alpha-ketoglutarate لـ Glutamate، البيروفات
هيرتبط مع الـ NADH، في وجود إنزيم اسمه لكتات
ديهيدروجيناز، حيعطيني لكتات و NAD+، الـ Decrease في
الـ Absorbance، يعني الـ NADH تحولت لـ NAD+، صار لها
reduction، يعني حيصير في عندي Decrease في
الـ absorbance، هذا النقصان في الـ absorbance هنقرأه
على 340 nanometer، الـ wavelength، يعني في منطقة
الـ UV، وهذا التفاعل، والنقصان في الـ absorbance، هيعبر
عن الـ activity تبع الـ enzyme في العينة، برضه الـ
procedure مش مذكورة، هنذكرها لما نشتغل الفحص، طبعًا
إحنا بنرجع للجامعة، هنشتغل الـ ALT يا الـ AST، لأن
الإثنين نفس الـ procedure، تمام؟
الـ Normal Range لـ ALT عند الذكور من 13 لـ 35
International Unit Per Liter، عند الإناث من 10 لـ 30
International Unit Per Liter، High Serum Levels in
Acute Hepatitis، يعني الـ ALT بيكون موجود بتركيز
عالي جدًا في الـ Serum في حالات الـ Acute
Hepatitis (الالتهاب الحاد في خلايا الكبد)، تمام؟
بيصل تركيز الـ ALT في حالات الـ Acute Hepatitis من
300 لـ 1000 International Unit per Liter، تمام؟ الـ
ALT بيكون بتركيز عالي جدًا، موجود في السيرم عند
شخص اللي بيكون عنده التهاب حاد في الكبد، وبيصل
تركيز الإنزيم من 300 لـ 1000 IU per liter، لكن بيصير
له moderate elevation، الـ Moderate elevation يعني
الـ ALT بيصير له ارتفاع بشكل متوسط في حالات الـ
Alcohol Hepatitis، يعني Hepatitis معناها التهاب في
خلايا الكبد، Alcohol Hepatitis، إن اللي سبب التهاب
في خلايا الكبد، تناول الكحوليات، من 100 لـ 300
International Unit per Liter، بارتفاع الـ ALT في
السيرم في حالة الـ Alcohol Hepatitis، Minor
elevation (بارتفاع الـ ALT بشكل بسيط في حالات
التليف الكبدي)، تليف الكبد، الـ Hepatitis C، التهاب
الكبد نتيجة الفيروس
Hepatitis C، نتيجة فيروس، تلتهابت خلايا الكبد، وأيضًا في
حالة الـ Non-alcoholic Steatohepatitis، اللي اختصاره
NASH، الـ Non-alcoholic Steatohepatitis، هذا مرض، طبعًا
بيسموه مرض تشمع الكبد، تشمع الكبد، أنه الدهون بتبدأ
تتراكم على الـ liver، طبعًا الدهون بتبدأ تتراكم على
الـ liver، ومش بالضرورة يصيب الناس اللي بتناولوا كحول
يعني بيسموه non-alcoholic، يعني اللي بينصابوا فيه كمان
ما بيشربوا كحول، أنه نحكي مثلًا من الكحول هي عاملة
هذه المشكلة، هدول الأشخاص، المشكلة عندهم metabolic
syndrome، يعني سمنة، نتيجة الزيادة في الوزن، نتيجة
ارتفاع السكر في الدم، بميكانيزمات معينة، الدهون
عندهم تتراكم على الكبد، برضه هدول الأشخاص، بيصير
عندهم Minor elevation (ارتفاع بسيط في الـ ALT)
تقريبًا من 50 لـ 100 International Unit per Liter
بيرتفع طبعًا الـ Non-alcoholic steatohepatitis، لو
حبيتوا تعرفوا هذا المرض، ممكن على جوجل تشوفوه و
تبحثوا عنه، تمام، Levels of AST and ALT، AST is
assessed along with ALT، الـ Monitoring Liver Damage، يا
جماعة، ما بنطلب كل فحص لحاله، عادة الـ AST والـ ALT
الإثنين بينطلبوا مع بعض، عشان نشوف وضع الكبد
ونشوف هل حدث liver damage or not، تمام؟ These two
values normally exist in an approximately واحد
لواحد ratio، عند الإنسان الطبيعي الـ AST والـ ALT
الإثنين تقريبًا في السيرم نفس التركيز، فالـ ratio
كل الـ ALB عن الـ ALB الآخر. أنا في عندي ALB موجود في
الكبد، في الـ bone، في الـ placenta، في الـ
intestine. هذه كلها نظائر للإنزيم، كلها تتشارك مع
بعضها في خصائص و بتختلف مع بعضها في خصائص. كيف بدي
أفرق بينهم و أفصلهم؟ بتقنية الـ Electrophoresis
تفصل الـ ALB الأربعة اللي جاية من الكبد و الـ bone
و الـ placenta و الـ intestine، و بتحسب تركيز كل ALB
على حدة. يعني الـ ALB اللي جاي من الكبد بتم حساب
تركيزه، من الـ bone، من الـ placenta، من الـ intestine
بواسطة الـ Electrophoresis. بحكي للـ ALB هذا النظير
اللي بيكون في الكبد، على الـ Electrophoresis، على
الجل أو الـ cellulose acetate، بيمشي بشكل أسرع. لكن
الـ ALB اللي بيطلع من الـ intestine، في الـ
Electrophoresis أثناء الفصل، لما بيمشي بيكون قطة
واحدة. هذه من خصائصهم، تمام؟ أو تقنية أخرى هي
immunochemical. بيعتبروا أن الـ enzyme، هذا النظير
الـ ALB، Antigen. الـ Enzyme عبارة عن الـ Antigen.
بروحي جيبوا Antibody متخصص لهذا الـ Antigen. فالـ
Antibody بربط بالـ Enzyme و بعطيني Complex
(Antibody-Antigen Reaction). بحسب هذا الـ Complex
بطرق مناعية عشان أشوف تركيز الـ Enzyme، تمام؟ لكن يا
جماعة، هنا بدنا نركز على شغلة. الـ ALB موجود في الـ
serum تبع الإنسان بتركيز قليل جداً، زي الـ ALT
و الـ AST. لكن في حال إجاني شخص فحص له الـ ALB اللي
في الـ serum و لقيته عالي كتير كتير كتير، هذا
بيعطيك مؤشر على شو؟ إنه حدث damage في الـ organ.
طيب أي organ بالظبط؟ هل حدث damage في الـ liver ولا
في الـ bone ولا في الـ placenta ولا في الـ intestine؟
ما بتقدر تعرف من خلال الفحص، تمام؟ إذا فحص الـ ALP،
لو كان الـ ALP عالي كتير في الدم، بعطيكي مؤشر إن
هذا الشخص عنده tissue damage، عنده تدمير في الخلايا
وفي أعضاء معينة. طب إيش هذه الـ organ اللي صار إليها
damage؟ هل الكبد اتدمر؟ ولا الـ bone اتدمر؟ ولا
الـ placenta؟ ولا الـ intestine؟ ما هي أربع مناطق
فيهم ALP، ما بنعرف، تمام؟ لو بدي أعرف وين الدمج
بالظبط، بتروحي تعملي الـ Electrophoresis عشان تشوفي
الـ ALB اللي جاي من الكبد، و الـ ALB اللي جاي من
الـ bone، و الـ ALB اللي جاي من الـ placenta، و الـ ALB
اللي جاي من الـ intestine. مين أعلى واحد في التركيز؟
طبعاً في جهاز اسمه Densitometer بيحدد تركيز كل واحد
على حدة. فبتعرفي اللي أعلى في التركيز، معناه هذا
العضو هو اللي صار فيه الدمج، تمام؟ عشان هيك فحص الـ
ALP مش متخصص للكبد، بيرتفع في حالات مشاكل العظام،
مشاكل الـ placenta، مشاكل الأمعاء، تمام؟ هذه الشغلة
كتير ضرورية نفهمها. الـ Clinical Significance، بدنا
نحكي عن أهمية إنزيم الـ ALP، أهمية هذا الفحص.
Alkaline phosphatase is an enzyme found in the
liver, bone, placenta, intestine, and kidneys. الـ ALP
عبارة عن إنزيم موجود في الـ tissue كتيرة، في الكبد
و في الـ bone، و في الـ placenta، و الـ intestine، و الـ
kidneys. و لو قرأتم مقالة، هيحكيلكم إن الـ ALP موجود
في كل الـ organ، في كل الـ tissue اللي موجودة في
الجسم، فيها ALP، تمام؟ تركيزه في الدم قليل جداً، هذا
الوضع الطبيعي. لكن مكانه الأصلي جوات الخلايا.
Primarily in the cells lining the biliary tract.
يعني يا جماعة، كمان الـ ALP موجود في الخلايا اللي
بتكون الـ biliary tract، القناة الصفراوية. هالجُزء دي
اكم تتخيلوا معي، فوق في الكبد، اللي بيصل بين الكبد
والأمعاء اللي موجودة تحت، الـ intestine، قناة، القناة
الصفراوية، الـ biliary duct. إذن، في عندي كبد، وتحتها في
قناة صفراوية، biliary duct، وتحت القناة الصفراوية في
الأمعاء. هالجُزء، هذه الـ biliary duct، القناة الصفراوية،
الخلايا اللي فيها، هذه الخلايا أيضاً موجود فيها
الـ ALP، تمام؟ أيضاً هذه الخلايا اللي بتكون القناة
الصفراوية، لو اتكون في القناة stones، حصاوي، هذه
الحصاوي هتدمر الخلايا، وبالتالي الخلايا هتبدأ تفرز
ALP. إذاً، انتبهوا، الـ ALP موجود بشكل أساسي في الخلايا
اللي بتكون القناة الصفراوية. فلو اتكونت حصاوي في
القناة الصفراوية، هتأثر على الخلايا الموجودة هناك
وبالتالي تبدأ الخلايا تفرز ALP ويزيد تركيزه في
الدم. عشان هيك حكينا إن الـ ALP يعني بنعتبره مؤشر
لوجود كوليستاسيس، لوجود حصاوي في القناة الصفراوية. إذن
كمان شغلة بدي أحكيلكم إياها، إنه كمان لما بيصير عندي دمج
في خلايا الكبد، يعني خلايا الكبد اتدمرت، برضه الـ
ALP هيزيد في الدم. لأن الكبد برضه بفرز ALP، تمام؟
وبالتالي هيطلع الـ ALP من الكبد على الدم، ولكن بشكل
أكبر. الـ ALP بيزيد كتير كتير كتير لما بتتكون حصاوي
في القناة الصفراوية، لأن هذه الحصاوي اللي في
القناة هتأثر على الخلايا اللي في القناة، وبالتالي
هتبدأ تفرز ALP ويزيد تركيزه بشكل أكبر، تمام؟ أيضاً
الـ ALP بيكون موجود في الـ osteoblast، الخلايا
البنائية للعظم، تمام؟ Involved in the formation of
a new bone. الجسم العظم لما بيتبنى يحتاج لـ
osteoblast، خلايا بناء عشان تبنيها. هذه الخلايا برضه
بتفرز ALP جواها، في ALP، تمام؟ فالـ ALP is normally
excreted from the liver in the bile. برضه الـ ALP
يا جماعة، بشكل طبيعي بيصير له excretion من الكبد إلى
الـ biliary duct، للقناة الصفراوية، بشكل طبيعي. زيادة
الـ ALP، زيادة الـ ALP، بنشوفه بشكل شائع عند الـ
bone growth، عند الـ children، الأطفال. الأطفال،
الأطفال، مش بنحكي مرض، بيكونوا في مرحلة بناء للعظم
تبعهم، البناء، يعني خلايا الـ osteoblast بدها تبدأ
تشتغل، الخلايا البنائية، الخلايا هذه بتبدأ تفرز
أثناء بناء العظام، بتبدأ تفرز الـ ALP، لأنه فيها
ALP، تمام؟ وبالتالي عند الأطفال، لو فحصنا ALP، حالة
جاء عالي عندهم، مش عالي لأن عندهم حالات مرضية، عالي
لأنهم في مرحلة بناء، الـ osteoblast، الخلايا البنائية
للعظم تبدأ تشتغل عندهم، وبالتالي أثناء شغلها
بيصير في release للـ ALP، بيطلع الـ ALP على الدم
ويرتفع تركيزه. أيضاً الـ ALP بيرتفع في حالات liver
disease، مشاكل الكبد، لأنه أصلاً هو موجود في الكبد، صح
ولا لأ؟ فأي دمج في الكبد، هيطلع على الدم ويزيد
تركيزه. برضه الـ ALP بيزيد في حالات الـ biliary
obstruction، انسداد في القناة الصفراوية نتيجة تكوين
stones. حكينا القناة الصفراوية، لو اتكونت فيها حصاوي،
الخلايا اللي بتكون القناة، أصلاً فيها ALP، وبالتالي
وجود الحصاوي في هذه الخلايا، هيدمرها ويخليها تفرز
ALP منها للدم، تمام؟ إذن ثلاث حالات بيرتفع فيهم الـ
ALP: تكوين الـ stones في القناة الصفراوية، وجود مشكلة
في الكبد، حالات الـ growth اللي هي عند الأطفال بشكل
طبيعي. Serum ALP Activity Primarily Reflects
the changes in bone and liver function. طبعاً تركيز
الـ ALP، نشاط الـ ALP، بيعكس مدى التغيرات اللي بتصير
في الكبد و الـ bone، أكيد، لأنه أصلاً هو موجود في الكبد
وموجود في الـ bone، فأي مشكلة فيهم، في الـ liver أو في
الـ bone، هتأثر على تركيز الـ ALP. وبالتالي، حتى لو كان
هناك زيادة ALP أعلى، ممكن تجدها في أعضاء أخرى برضه،
الـ ALP موجودة في أعضاء أخرى، وبتركيز عالٍ، على
الرغم من أن الـ ALP، اتفقنا، موجود في كل الـ tissue،
في كل الـ organ، لكن فعلياً الـ activity تبعت الـ
ALP، أكثر شيء يعني، تتأثر في مشاكل الـ liver و الـ
bone، هم اللي بيحددوا تركيز الـ ALP، الـ liver و الـ
bone، على الرغم من أنه موجود في organs أخرى، بتركيز
عالي، تمام؟ Specimen collection، جمع العينة، a blood
sample should be drawn after a fast of at least 8 hours.
يعني لما بنعمل فحص الـ ALP، يفضل، يفضل أن نصوم 8
ساعات قبل إجراء الفحص. العينة serum أو بلازما. نوع الـ
anticoagulant المسموح فقط فيه هو الهيبارين. Slight
hemolysis is tolerable. يعني لما بيكون العينة أنت
شايفة فيها hemolysis، شايفة إنه فيه تكسير في
الـ RBCs، ولكن slight، بسيط أو خفيف، بقبلها،
tolerable، تمام. But gross hemolysis، لو جاتني عينة
الـ RBCs أغلبها مكسرة، gross hemolysis، gross يعني الـ
hemolysis كتير كتير شديد، هذه should be avoided.
يعني بأرفض العينة تماماً. إذن بفهم إن الـ ALP أيضاً
موجود جوة الـ RBCs، متفقين؟ موجود في كل أنسجة
الجسم تقريباً، هذا الـ enzyme موجود في كل أنسجة
الجسم، حتى الـ RBCs، تمام؟ الـ point الرابع من
الشريحة ما بدنا إياه. ننتقل للـ point الخامسة. It is
best to analyze ALP specimens the same day they
are drawn. يفضل ما نخزن العينة، يعني ما
نخزن الـ serum أو البلازما في الثلاجة أو بالفريزر
عشان أشتغل الـ ALP، ويفضل في اليوم اللي بجمع فيه
العينة، أفحص الـ enzyme على طول، تمام؟ الـ ALP is
inhibited by metal-complexing anticoagulants. إيش
يعني؟ يعني الـ EDTA، والأوكزاليت، والسترات، هذه الـ
anticoagulants ممنوع أسحب فيها، تمام؟ EDTA،
أوكزاليت، سترات، ممنوع أسحب فيهم. ليش؟ لأن كل هذه الـ
anticoagulants بتشتغل كـ chelating agents، بتشتغل
فتسحب المغنيسيوم، تمام؟ المغنيسيوم اتفقنا هذا الـ
co-factor للـ ALP، هو المسؤول عن نشاط إنزيم الـ ALP.
فلو انسحب المغنيسيوم، لو أنا يا جماعة عينت الدم
بـ EDTA أو أوكساليت أو سترات، هذه الـ anticoagulants
بتشتغل chelating agents، بتسحب المغنيسيوم، وبالتالي
الـ ALP مش هيشتغل، الـ enzyme مش هيشتغل على الـ
substrate تبعته، لأن الـ cofactor تم سحبه. عشان هيك
ممنوعة هذه الـ anticoagulants، لإنه بتعمل inhibit للـ
enzyme، بتثبط الـ ALP. كيف بتثبته؟ من خلال إنها بتسحب
المغنيسيوم. عشان هيك ممنوع الجمع بهذه الـ
anticoagulants. Assay for enzyme activity، بدنا نشوف
الطرق المستخدمة لقياس نشاط الـ ALP. Almost all
assays for ALP employ p-nitrophenyl phosphate as
the substrate. تقريباً كل الطرق، وكل الـ kits، الـ
reagents بيحتوي على الـ substrate. إيش هذه الـ
substrate؟ اسمها الـ p-nitrophenyl phosphate. هذه
الـ substrate تبع إنزيم الـ ALP، تمام؟ هالجُزء،
انتبهوا، تحت في الـ reaction، بدنا نتخيل كيف 390
الـ group؟ هو الـ Gamma Glutamyl، الـ GGT بيحكيلك
موجود بتركيز عالي جداً في الـ liver; it is a high
concentration in liver tissue. موجود بتركيز عالي
جداً في الكبد، أيضاً موجود في الـ kidney، وموجود في
الـ pancreas، وأضيفوا عليها: موجود أيضاً في الخلايا
التي تُكوّن الـ biliary tract، القنوات الصفراوية، تمام؟
وموجود في الدم بالوضع الطبيعي بتركيز قليل. الـ
Diagnostic Significance: أهمية فحص الـ GGT
Increased plasma GGT is associated with
hepatobiliary disease. يعني الـ GGT يا جماعة بيرتفع
لما بيصير فيه damage، أو حصوات (stones) في
الـ Biliary Tract، في القناة الصفراوية، وبالتالي
الحصوات ستؤثر على الخلايا الموجودة في هذه المنطقة.
هذه الخلايا ستبدأ بإفراز، ستفرز الـ GGT للبلازما،
تمام؟ Highest seen in biliary obstruction. في
حالات الانسداد في القنوات الصفراوية بسبب تكوين
stones، بيكون يعني تركيزه عالي جداً جداً أيضاً في
حالات الـ Alcohol cirrhosis، تليف الكبد الذي
سببه تناول الكحول، أيضاً يرتفع الـ GGT في البلازما.
فحص الـ GGT يُستخدم مع ALB، يعني يُجرى
الاثنان معاً to differentiate between liver and
bone disease، عشان نميز هل المشكلة في الكبد أم
المشكلة في العظام. خلّيني أركز على هذه النقطة، لأنها
كتير مهمة. حكينا أن الـ ALB موجود في الكبد وموجود
في العظام، لكن الـ GGT موجود في الكبد فقط، ليس موجوداً في
العظام. فانت لما بتعمل الاثنين معاً، تخيل إيجاني
مريض، عملت له فحص ALB و GGT، الاثنان معاً، وطلع الاثنان
عالِيين جداً، معناه أكيد في عندي مشكلة في الكبد، مشكلة
في القنوات الصفراوية، فيها حصوات. لما يكون الاثنان
عالِيين، تمام؟ لكن إيجاني مريض آخر، عملت له الاثنين
معاً، الـ ALB والـ GGT، طلع الـ ALB عنده عالياً، لكن الـ
GGT طبيعي، إذن هذا يؤكد أنه لديه مشكلة في
العظام، مشكلة في العظام. الـ GGT عنده طبيعي،
يعني القنوات الصفراوية لديه طبيعية، والكبد لديه
طبيعي. إذن ارتفاع الـ ALB وحده، يُعتبر indication
أن المشكلة في العظام، لأنه وحده موجود في الـ bone
... يعني ليس الـ GGT، تمام؟ إذاً لو عملت الفحصين
معاً، والاثنان طلعا عالِيين، إذن أكيد المشكلة في
الكبد وفي القنوات الصفراوية. لو عملت الفحصين معاً
والـ ALB كان عالياً، والـ GGT كان طبيعياً، إذن أكيد
المشكلة تكون في الـ bone، في العظم، تمام؟
الـ "Say for enzyme activity" بدنا نشوف الطرق
المستخدمة لقياس الـ enzyme. كمان يا جماعة، كيتاتنا
التي تفحص الـ GGT، أيضاً colorimetric reaction، مثل
فحص الـ ALB تماماً. لذلك، عندما نعود إلى الجامعة
سوف نعمل واحداً منهما، سنعمل إما ALP أو GGT، لكن ما
هو متوفر لدينا في الجامعة هو ALP، تمام؟ لكن هذا لا
يمنع أن نرى التفاعل، كيف يكون التفاعل،
انتبهوا على الصندوق الأزرق. هلجيت، الـ Serum للمريض
يحتوي على الـ GGT، يحتوي على الـ enzyme،
تمام؟ وأنا أريد فحص activity لها. هلجيت الـ
reaction، يحتوي على الـ substrate التي سيُكسرها الـ
enzyme. الـ substrate هي الـ L-Gamma-Glutamyl-p-Nitro-anilide
زائد Glycyl-Glycine. هذه كلها الـ
substrate الموجودة في الـ reagent، سيعمل عليها الـ
enzyme الموجود في الـ serum، ومحصلة التفاعل
ستعطيني مادة تُسمى الـ p-Nitroaniline و الـ Gamma
Glutamyl Glycylglycine. إذن محصلة التفاعل: إعطاء مادة
ملونة، الـ p-Nitroaniline، وشدة اللون الذي تكون،
نتيجة محصلة التفاعل، ستتناسب تناسباً طردياً مع نشاط الـ
enzyme في العينة. ومادة الـ p-Nitroaniline سنقرأها
على wavelength 405 نانومتر. الـ Reference Range عند
الرجال من 6 إلى 45 International Unit Per Liter، عند
الإناث من 5 إلى 30 International Unit Per Liter. إذن،
المادة المتفاعلة: إن السيروم يحتوي على الإنزيم
والـ reagent يحتوي على الـ substrate، عندما أضعهما معاً، الـ
enzyme يُكسر الـ substrate. محصلة التفاعل مادة
ملونة، نقيس هذه المادة على wavelength معينة،
وشدة اللون ستتناسب تناسباً طردياً مع activity الـ
enzyme. وبهذه نكون قد أنهينا chapter liver function
tests، ويعطيكم ألف عافية.