بسم الله الرحمن الرحيم موضوع محاضرتنا اليوم إن شاء الله
بتحدث عن الـAutomated Hematology Cell
Counters أو الـAutomated Hematology Analysers ما
يُسمى بأجهزة الـCBC راح نتعرف عليها، نتعرف كيف
بتشتغل، الـPrinciple اللي لها، إيش النتائج اللي
بتطلع يعني أو بيقدر يحسبها جهاز الـCBC
إيش الأخطاء اللي ممكن تصير، كيف ممكن أنا أحاول
أعالجها، The Coulter Principle هذه الـPrinciple
اللي راح نتكلم فيها تعتبر هي أول طريقة استخدمت
وأول Principle استخدمت لعد خلايا الدم وتصنيفها
ومعرفة أنواعها، لكن اليوم في طرق متقدمة أكثر في
عندنا طرق حديثة، في عندنا طرق بالـFlow cytometry
باستخدام الـFluorescence لكن هذه الطرق يعني مكلفة
فبالتالي ما بنلاقي لها انتشار واسع في المختبرات
يعني يمكن جهاز Flow cytometry في غزة ما بعرفش واحد أو
اتنين موجودين ولسه مش شغالين، عشان هيك أجهزة الـ
CBC اللي بتشتغل على الـCoulter Principle هذه
موجودة ومتوافرة ومش غالية قياسًا بالأجهزة المتقدمة
خلّينا نفهم الـprinciple لهذه التقنية using this
technology، cells are sized and counted by
detecting and measuring changes in electrical
resistance when a particle passes through a small
aperture، this is called an electrical impedance
principle of counting cells، إيش يعني الكلام هذا؟
باستخدام التقنية هذه، بتكون الخلايا موجودة في Normal
Saline، تمام؟ ويسمح لهذه الخلايا أن تمر بين قطبين
قطب سالب وقطب موجب، هدول القطبين موجودين في الـ
Normal Saline نفسه اللي موجودة فيه الخلايا، بحيث
أنه هنلاقي يعني بين القطبين أساسًا في عندي Saline
يعني في عندي شحنات سالبة أو شحنات موجبة، بمعنى إن
الدائرة الكهربائية بتكون مغلقة في هذا المحتوى أو
في هذا الـContainer، فبالتالي إحنا بنسمح بمرور هذه
الخلايا ما بين القطب السالب والموجب عبر ثقب صغير
عبر فتحة صغيرة جدًا، الآن كل ما مرت خلية، الخلية هذه
بتتميز بإن لها Electrical resistance، طبيعة الخلية
مقاومة لمرور التيار الكهربائي، فكل ما مرت خلية،
هتعمل فرق جهد نتيجة المقاومة اللي صارت من الخلية
هينتج فرق جهد، فرق الجهد هينتج عنه «pulse» الـ
«pulse» هذه عددها بيعبر عن عدد الخلايا اللي مرت،
ليش؟ لأن الخلايا هذه بتمر واحدة واحدة، يعني ما بيمر
أكثر من خلية في نفس الوقت، فكل «pulse» نتجت عن خلية
يعني عدد الـ«pulses» بيعبر عن عدد الخلايا، طيب، كل
ما كان حجم الخلية أكبر كل ما كانت الـ«pulse» أعلى
بمعنى أن ارتفاع الـ«pulse» يدل على حجم الخلية، بيتم
ترجمة أو قياس ارتفاع الـPulse وبيتم ترجمته إلى
أحجام الخلايا، وبالتالي الجهاز بيقوم بتمييز الخلايا
حسب حجمها إلى أنواعها المختلفة زي ما عندنا هنشوف
لقدام، إذن نرجع كمان مرة، نفرق الكلام المكتوب هل قد
راح نفهمه أكثر، Cells are sized and counted by
detecting and measuring changes، تغيرات اللي بتحصل
في الـin electrical resistance لما Particle
passed through a small aperture، الـParticle هدمين
اللي مر عبر الفتحة الصغيرة اللي هو الـErythrocyte
أو الـWhite blood cell، أنا بحكي Erythrocyte مثلًا
على سبيل المثال الخلية، خلية الدم تمر، هتعمل
مقاومة، This is called the electrical impedance
principle of quantum mechanics، الكلام راح يوضح هنا
بشكل مفصل أكثر، إيش اللي بيصير فعلًا في عندي Two
tubes، تيوب خارجية، هذه التيوب الخارجية بيكون الجهاز
عامل Dilution لعينة الـBlood بي Saline في هذا
التيوب، في التيوب الخارجي، في داخل هذا التيوب، تيوب
آخر، هلقيت تيوب مجوف، التيوب الداخلي فيه Orifice فيه
فتحة صغيرة أو Aperture صغير بسمح بمرور الخلايا
خلية خلية، تمام؟ يعني أنا عندي الخلايا موجودة وين؟
في الخارجي Diluted بالSaline في الخارجي، الآن
التيوب الخارجي موجود فيه قطب سالب، التيوب الداخلي
موجود فيه قطب موجب، هيك الدائرة الكهربائية بتكون
مكتملة لما أنا أشبك بـDirect Current، هتكون
الدائرة الكهربائية مكتملة ويمشي التيار فيها هلقيت؟
إيش اللي بيصير؟ الجهاز بيعمل Vacuum ضغط معين أو
Pressure بسيط على صبح السائل في الأنبوبة الخارجية
هذا يؤدي إلى اندفاع السائل حاملًا معه الخلايا إلى
الأنبوبة الداخلية، عبر الفتحة الصغيرة اللي هي الـ
Orifice، فهنلاحظ إنه هتسير الخلايا تدخل واحدة واحدة
كل ما تدخل خلية هتعمل نبضة نتيجة المقاومة، انقطاع
بسيط في التيار الكهربائي، هينتج عنه فرق جهد يُقرأ
على إنه خلية، تمام؟ A blood sample is diluted in
saline، a good conductor of electrical current، اللي
هو الـsaline، and the cells are pulled through an
aperture by creating a vacuum، يعني بندفع الخلايا
في الأنبوب، في أنبوب الثاني عن طريق Vacuum معين، Two
electrodes establish an electrical current، في عندي
Two electrodes بيعملولي Electrical current، the
external electrode is located in the blood cell
suspension، the second electrode is the internal
electrode and is located in the glass hollow tube
which contains the aperture، زي ما قلتلكم قطب في
الأنبوب الخارجي وقطب في الأنبوب الداخلي بيمر
مابينهما، Low frequency electrical current is applied
to the external electrode and internal electrode،
Direct current is applied between the two
electrodes، لما بنمرر الـDirect current between
two electrodes، بتمشي الدائرة، Electrical resistance
or impedance occurs as the cells pass through the
aperture causing a change in voltage، لما تمر
الخلية هينشأ مقاومة، بينتج عنها فرق جهد، This change
in voltage generates a pulse، طبعًا هذا التغير في
فرق الجهد بعمل عندي Pulse، The number of pulses is
proportional to the number of cells counted، هذا
يتناسب طرديًا مع عدد الخلايا اللي تم عدها، The size
of the voltage pulse، حجم البلس اللي نشأت is
directly proportional to the volume or size of the
cell، يتناسب طرديًا مع حجم الخلية
هذه كانت مفهومة استخدامها في تجارب أسابيع قبلها
لتخصيص جميع خلايا الخلايا، يعني كان التمييز ولزال
في الأجهزة اللي بتستخدم هذه الـPrinciple، التمييز
فقط على حجم الخلايا، يعني كل خلايا لها حجم معين
بتتم تمييزها إنه هذه مثلًا Neutrophil على حجمها، هذه
مثلًا Red blood cell برضه على حجمها، لكنها تستخدم
الآن أساسًا لتخصيص ومساعدة Red cell وPlatelets، يعني هنا
بقول لك يعني يمكن التقنية هذه بس بتستخدم حاليًا في
الـRBCs والـPlatelets، في حين أن الـWhite Blood
Cells، لو أنا بدي أطور الجهاز أو بدي أستخدم أجهزة
متطورة أكثر هتستخدم تقنيات متقدمة أكثر عشان أتميز
عندي أنواع الخلايا، أنواع الـWhite Blood Cells عن
بعض، لكن أنا بطمنكم معظم الأجهزة اللي عندنا بتعد كل
الخلايا وبتميزها على الـSize، تمام؟ هذه مجرد صور
لنفس الكلام اللي حكيناه، أنبوب خارجي، أنبوب داخلي،
هذه الصورة حقيقية، هي عندك أنبوب وبتنتقل عينة الـ
Blood من واحد إلى واحد بهذا الشكل
طيب، هنا بقول لك بالنسبة للأجهزة المتاحة هلقيت يعني
أنت لو إجيت على أجهزة الـCPC لو عملت مثلًا فحص
CPC في مختبر، في مختبر ثاني على جهازين مختلفين
هتلاقي كمية النتائج أو عدد النتائج اللي طلعت لك في
كل CPC ممكن يختلف من جهاز إلى جهاز، يعني في CPC
بيطلع لك مثلًا 8 نتائج، في CPC بيطلع لك 18 نتيجة، إيش
الفرق بين هذا الجهاز وهذا الجهاز؟ هلقيت بالنسبة
للـRBCs الـParameters اللي هي الـRBCs count و
الـHemoglobin والـHematocrit والـBlood
Indices، كل الأجهزة بتطلعها وما فيش فرق ما بينها
تمام؟ يعني ما فيش فرق، كل الأجهزة عندها القدرة أنها
تطلعها لأنها بتعتمد بشكل أساسي على Principles
بسيطة اللي هو على الحجم وعلى العد، لكن نيجي للـ
White PCs، في عندي بعض الأجهزة بتعطيك الـ
Differential كامل، خمس خلايا يعني بتعطيكي
Neutrophil وEosinophil وBasophil وLymphocyte
وMonocyte، يعني بتعطيكي Five part differential، لكن
في أجهزة والجهاز اللي عندنا موجود في الجامعة
بيعطيك ثلاثة، كيف؟ بيعطيك Lymphocyte وNeutrophil
والباقيين الثلاثة ضمن حاجة بيسميها Med، الخلايا اللي
بتقع في الوسط من ناحية الحجم، فهذه بتشمل «إزينو» و
«بيزو» و«مونو»، إذن الـ«3 part differential» مكون
من الـ«نيوتروفيلوليمفوسايت» و«MED»، تمام؟ أو زي
ما قلت لك، «5 part differential»، فيه إن بعض الأجهزة
برضه ممكن تعطينا Parameter سادس اللي هو بتعد لـ
«Nucleated RBC» وتميزها، يعني أجهزة عندها القدرة
أنها تعمل Reticulocyte count اللي هو الـ
Reticulocyte اللي شغلناه إحنا بالطريقة الـManual
ممكن لو أنا صبغت الـRNA بـFluorescence dye ممكن
يتم تمييز الـReticulocyte يعني حسب نوع الجهاز
هذا عندنا جهاز الـCelldyne 1800 هذا اللي موجود
عندنا في المختبر بتاع الجامعة، زي ما أنتم شايفين
الجهاز متكامل، فيه له شاشة وطبعًا مشبوك بطابعة وفيه
وحدة تخزين داخلية وفيه مكان لسحب العينة، طبعًا هنا
بتتم سحب العينة وإنه يعمل لها Processing، إذا كان
الجهاز Ready جاهز للشغل بيطلع من هنا رب زي أنبوب
حديد في هذا المكان بسيط، بدخل العينة فيه وبكبس
بإيدي على الكبسة الرمادية هذه اللي ورا، لما بكبس
بإيدي على الكبسة الرمادية، معنى الكلام إنه بقول
للجهاز اشتغل اسحب العينة، فبيسحب الجهاز العينة
وبيشتغلها كاملة جوا وبيطلع النتائج خلال دقيقة
واحدة، في عندي هنا زي ما أنتم شايفين إيه شاشة بتطلع
عليها النتائج، في عندي Keyboard ممكن أدخل بيانات
المريض، في عندي هنا ثلاث زرار، هدول بيبينوني وضع
الجهاز هل هو بيشغل، هل هو جاهز للشغل، هل في عندي
مثلًا مشكلة في الـReagent أو Defect أو شغل Reagent
خلص مثلًا، حد عامل لك Log، أحد المسارات مسكر، بيوضح لي
أنه فيه مشكلة، فهذا بشكل عام يعني جهاز الـCPC،
إذا أنا المكان اللي بلزمني أني هدخل العينة والـ
Keyboard عشان أدخل الاسم، بعد هيك هو هيعمل كل حاجة
طيب، إيش خصائص جهاز الـCelldyne اللي بنحكي عنه؟
بيعطيني 18 Parameter يعني بيعطيني 18 نتيجة، الـ
Differential 3 part، في عندك ط
One hemoglobin sample is used to analyze the red
blood cells and the platelets while the second
sample is used to analyze the white blood cells
and hemoglobin. تمام هيك يعني العينة اللي بنعمل لها
dilution بتنقسم من نصين، بتتمشي في طريقين، طريق فيهم
للـ white bcs والـ hemoglobin، وطريق للـ RBCs والـ
platelets. Electrical impedance is used to count the
white blood cells, red blood cells and the
platelets as they pass through the aperture. يعني
بتتم عدهم من خلال مرورهم عبر الفتحة اللي حكينا
عنها. As each cell is drawn through the aperture, a
change in electrical resistance occurs, generating
a voltage pulse. نفس الكلام اللي حكيناه، كل خلية
بتمر بتعمل pulse. The number of pulses during a
cycle corresponds to the number of cells counted.
يعني عدد الـ pulses بيعبّر عن عدد الخلايا اللي
amplitude of each pulse اللي هو ارتفاع الـ pulse
is directly proportional to the cell volume. بيتناسب
عكسياً مع حجم الـ cell. طيب، نيجي للـ RBCs chamber، طبعاً
في عندي احنا زي ما قلنا هم مسارين، المسار الأول
اللي هنحكي فيه الـ RBCs والمسار التاني بتاع الـ
white pieces. اللي هيحصل في مسار الـ RBCs، أنا ما بعمل
حاجة للعينة أو الجهاز ما بيضيف عليها أي إشي غير
الـ Saline، بس بيعمل لها Dilution وبيبدأ يعد الخلايا.
كيف بيعدها؟ بيبدأ يعد الـ Pulses ويربطها بالحجم، أي
خلية من 2 إلى 20 femtoliters بيعدها على إنها
Platelet وأي خلية فوق الـ 36 femtoliters بيعدها
على إنها RBCs. إذا هو بيميز بشكل أساسي على حسب
الحجم. بمعنى لو في عندي RBCs صغيرة، حجمها صغير كتير
أو Schistocyte أو قطعة من RBCs، RBCs صغيرة اللي هي
Hemolysis هتنعد على إنها Platelets تمام؟ إذا هو
بيميز بشكل أساسي على الـ Size. هذا الـ chamber الأول.
نيجي للـ chamber التاني، في الـ chamber التاني بنضيف
Lysing reagent. الـ Lysing reagent إيش بيعمل؟ بيكسر
عندي كل الـ RBCs، لأن الـ RBCs سهل إنها تتكسر لأنها
Unucated Cells. فبتروح الـ RBCs، بيضل عندي بس الـ
White PCs. هلأ الجهاز هيبدأ يعد الـ White PCs، لكن
هيميز الخلايا مش على حجمها، على حجم أنويتها، ليش؟
لأن الـ Lysing Reagent اللي أنا أضفته كسر الـ RBCs
بالإضافة لإنه عمل Collapsing أو shrinking للـ White
BCs. يعني خلّى الخلية كلها تنكمش حوالين النواة كأنه
الـ Cytoplasm بتاعها انعدم، فقط ضلت عند النواة.
فبالتالي هو بعمل discrimination للـ White BCs مش
على حجم الخلية وإنما على حجم نواتها، تمام؟ ليش؟ لأن
الـ Cytoplasm تقريباً انعدم، انكمش، واضح هيك؟ وهيبلش
عندي في عد الـ White BCs وتمييزها على حسب حجم
أنويتها. هلاقيت بعد ما يخلص من عد الـ white pieces
هيقرأ السائل نفسه، الجهاز هذا اللي عملت للخلايا فيه
lysing، طبعاً أنا عملت lysing للـ RBCs، فطلع منها الـ
Hemoglobin، تمام؟ هو نفسه هذا السائل اللي انعدت عليه
الـ White pieces، هيمر الجهاز على ضوء 540 نانومتر
بنفس طريق الـ Hemoglobin ويقرأ تركيز الـ
Hemoglobin فيه. إذن هنا عد الـ White pieces وقرأ
الـ Hemoglobin، تمام؟ طيب، الآن في سؤال هيك يعني
ممكن يتبادر إلى الذهن لو لاحظته، أنا هنا ما كسرت الـ
White pieces صحيح؟ طيب، هل هتنعد الـ White pieces
مع الـ RPCs؟ وأول حاجة الـ White PCs أكبر، الجهاز
بيعد من 36 لـ 360، بيعدها تقريباً على إنها RPCs، لكن
لو كان في عندي White PCs حجمها وقع في هذا الـ
Range، خاصة الـ Lymphocyte وإنعدتياً بنات، مش هتأثر
على الـ Count، لأن عدد الـ White PCs قليل جداً
مقارنة بعدد الـ RPCs. يعني الـ White PCs الوحدة
بتاعتها ألف، يعني بنقول مثلاً من 4000 إلى 11000، الـ
RPCs بالملايين، يعني تقريباً كل واحدة White PCs
بقابلها 500 RPCs. فلو نعدّ كمين خلية من الـ White
PCs وكانت خلايا الـ White PCs ضمن الـ Normal Range،
مش هتأثر كتير على عدد الـ RPCs، مش هيكون لها التأثير
الملموس، واضح؟ فبالتالي احنا هنا خلينا الـ White
PCs زي ما هي لأن ما فيش عندي حاجة بتكسّر الـ White
PCs، وبتبقى على الـ RPCs الـ White PCs أقوى لأن
فيها نوع فصعب إنها تتكسّر، وتظل الـ RPCs عشان هي
احنا بنتركها، هي خلايا كبيرة، ولو إنعدت لو كانت
صغيرة أو إنعدت مش راح تأثر على الـ Count لأن أصلاً
هي عددها كتير قليل، تمام هيك؟ إذا هنا عدينا Platelet
وعدينا RPCs وعدينا White PCs، زي ما حكينا الـ
Hemoglobin بتتم باستخدام CNID3 Lysing Solution اللي
هو نفسه... هو نفس الـ solution اللي احنا استخدمنا
عشان يعمل Lysing للـ RBCs، هيكون عندي Imidazole
Hemoglobin Complex. هذا الـ Complex له لون بيتناسب
تناسبياً مع تركيز الـ Hemoglobin في العينة، وبنقرأ
على 540 نانومتر. هنا بقول لك الجهاز بيطلع عندنا اللي
هو الـ Cell Dyn، بيطلع عندنا الـ 3 parts differential،
بيطلع عندك الـ lymphocyte, neutrophil, and mid-size
population، بيعطيك هذا بيعطيك اللي هو الـ الـ
Percent Count أو الـ Relative Count، العدد النسبي
كنسبة مئوية، وبرضه بيحسب لك الـ Absolute Count، يعني
بيعطيك الرقم بطريقتين. Relative Count. نيجي لمتطلبات
العينة. العينة عادة مش مسموح تنسحب غير بإيديتا لا
بسوديامسترات ولا هيبارين ولا أي نوع Anti-coagulant
ثاني، لأن سترات الـ Particles بتاعتها كبيرة، قضايبات
بتاعة السترات كبيرة ممكن تنعد على إنها خلايا. الـ
Heparin بيأثر على عدد الـ Platelets بس الـ EDTA
مسموح إني أستخدمها، تمام؟ الحد الأدنى الـ Minimum
Sample Volume نص ML مع إن هو الجهاز في الـ Open
Mode، الطريقة العادية اللي بيشتغل عليها الجهاز بياخد
بس 30 ميكروليتر، لكن لو أنا سحبت عينة أقل من هيك ما
بضمن أنه أخد الـ 30 µL كاملين، ممكن لأن العينة
قليلة يكون سحب Air Bubbles، يكون سحب هواء، فبالتالي
هيكون الـ count خاطئ. عشان هيك أقل عينة الـ minimum
نص ML، يعني لو أنا جيت أسحب وأطلع معها أقل من نص
ML، المفروض ما أستخدمهاش أو أسحب عينة تانية. العينة
Stable في الـ Room Temperature. بنيجي لطرق الـ
Analysis. يمكن احنا نوّهنا لإلها، في عندي طريقتين
رئيسيات اللي هو "Whole Blood Mode"، إنه أنا ساحب
عينة دم في إيديتها، بفتح الغطاية وبحطها وبعمل
Aspiration، بضغط على الـ button اللي شوفناها، فبيسحب
الجهاز العينة وبيشتغل فيها، بحط عينة ورا التانية، كل
ما تخلص عينة بدخل اللي بعدها. الـ "Prediluted Mode"،
هنا زي ما قلت لكم العينة كميتها كتير قليلة، باخدها
من الـ skin من الـ baby مثلاً، بعمل لها dilution قبل ما
أدخلها على الجهاز، بعمل لها dilution 1 إلى 26 بـ
saline. بعد هيك بدخلها على الجهاز بنفس الطريقة
بتاعة الـ whole blood، يعني مش هتفرق الطريقة لكن
هنا النتائج بدي أضربها في معامل التخفيف. طب أي
نتائج اللي بدي أضربها في معامل التخفيف؟ أي حاجة
إلها علاقة بالـ count بضربها، يعني بضرب الـ RBCs، الـ
white BCs، للـ Platelets، هدول التلاتة اللي بنعدّوا
بالإضافة للـ Hemoglobin، هدول بنضربهم بمعامل
التخفيف، والـ hematocrit برضه لأنه برضه الـ
hematocrit هيتأثر، لكن الـ Parameters اللي ما
بتتأثر اللي هي إلها علاقة بالحجم، يعني مش معقول الـ
MCV حجم الخلية يتأثر لأنه خفّفت، صح؟ فأي حاجة إلها
علاقة بالـ Size بالحجم ما بتنضرب، تمام هيك؟
طيب نيجي لبعض مصادر الخطأ، يعني برضه يا بنات زي ما
فيه في الطرق الـ Manual مصادر خطأ، في عندنا في
الطرق الـ Automated مصادر خطأ. أول حاجة في الـ Cell
Count، في عملية الـ Counting للخلايا، أول مصدر للخطأ
ممكن نواجهه اللي هو وجود Cold Agglutinin، إيش يعني
Cold Agglutinin؟ أعتقد حكيت لكم إياها، وجود Auto
Antibodies بتتفاعل مع الخلايا على درجة حرارة الغرفة
وبتعمل لها agglutination، يعني هنشوف الخلايا متجمعة
مع بعض بهذا الشكل. طيب، هذا على إيش رح يؤثر؟
اتخيلوا معايا صار تجمع للخلايا، هتصير الخلايا تدخل
في الـ aperture مجموعات، يعني بدل ما تدخل خلية
واحدة، هيدخل عندك اتنين مع بعض، تلاتة، أربعة على
حسب التجمعات بتاعت الـ agglutination اللي صارت. طيب،
هذا هيأثر أكيد على الحجم، ليش؟ لأنه هو الجهاز بيحسب
المتوسط، مش هو احنا قلنا ارتفاع الـ Pulse بيعبّر
عن الحجم؟ هيك هيكون في عندي بعض الـ Pulses ارتفاعها
كبير، مظبوط؟ وهو عادة كيف بيحسب الـ MCV؟ بياخد متوسط
يعني بيجمع ارتفاع الـ Pulse على عددها، تمام؟ هو
بياخد متوسط مجموع ارتفاعات الـ Pulse اللي طلعت معاه
على عدد الـ Pulse، بيحسب منه الـ MCV. فإذا كان في
عندي مجموعات من الخلايا عاملة كأنها خلية واحدة، و
هي أساساً تجمع من أكثر من خلية، هيكون حجمها كبير، و
هتكون الـ Pulse بتاعتها كبيرة، فبالتالي هذا هيأثر
على حساب الـ MCV. إذن هذه شغلة، شغلة تانية هيأثر على
الـ Count بتاع الـ RBCs، لأن كل 3، 4، 5 خلية هتنعد
على إنها واحدة، بتخلط مع بعض، هتنعد على إنها خلية
كبيرة، إذن هيأثر على الـ count بتاع الـ RBCs، وهيأثر
على الـ MCV بإنه بيرفعه. Can be caused an increased
number of large red cells or red cell agglutinates
بسبب تجمعات الخلايا. If agglutinated red cells are
present, the automated hematocrit and MCHC are also
incorrect. يعني بقية الـ parameters هتكون خاطئة. ليش؟
لأنها كلها بالأساس يعني بتنحسب، يعني في عندنا حاجات
الجهاز بيقيسها، وفي حاجات الجهاز بيحسبها. احنا قلنا
إيش الأشياء اللي بيقيسها الجهاز؟ الجهاز بيقيس بعد
بيقيس Hemoglobin، بيقيس MCV، like RBC، بيقيس حجم، بس
أما عندك الـ MCH والـ MCHC، هذه بتنحسب من الأشياء
اللي تم قياسها، فبالتالي لو كان في خطأ في الأشياء
اللي تم قياسها هيكون فيه خطأ يترتب عليه خطأ في
الأشياء اللي بتنحسب حساباً، يعني حتى الـ Hematocrit
يا بنات في الـ Automated Cell Counters، في الأجهزة
هذه بينحسب حساباً، ما بينقرأش مباشرة. عدّنا هنشوف كيف
لما نأخذهم بالتفصيل. إذن الـ Parameters هتتأثر، وكل 382 00:27:
visible at the left بلاش هذه، هذه لما نأخذ الـ
histogram تفهموها طيب،
من مصادر الخطأ الأخرى اللي ممكن تواجهني وجود
blatant clumps and blatant satellitesالـ Platelet
Clumps أو Aggregates زي ما أنتم شايفين بعض
التجمعات للـ Platelets طبعًا هنا هذه هتؤدي لنقص ال
count بتاع البلاتلت لأنه هتتعد يعني عليها جسيمات
كبيرة ممكن تتعد عليها RBCs تمام فبالتالي هتؤدي
لنقص العدد بتاع البلاتلتز في عندي ظاهرة ثانية
بيسموها Platelet Satellitosis أحيانًا البلاتلتز
تتجمع حولين الـ Neutrophil تتجمع حولين الـ
Neutrophil طبعًا هيك هتأخذها الـ Neutrophil وتروح
فيها ومش هيتم عدها على إنها Platelets طيب، الآن لو
أنا أجيت عملت الـ CPC من الحاجات اللي كثير لازم
أكون حريصة فيها لما أطلع النتيجة عدد البلاتلت لو
لقيت عندي البلاتلت عددها قليل ضروري جدًا أتأكد أنه
فعلاً هذا هو عدد البلاتلت مش خطأ لأن البلاتلت من
الحاجات اللي شائع يصير فيها خطأ خاصة لو كانت عملية
السحب بطريقة يعني أنا عمال بسحب و بدور تحت الجلد
تعرفي إن وظيفة الـ Platelet إنها تعمل Clot و تسكر
المكان اللي فيه defect أو فيه مشكلة أو فيه نزف
فأنا لما بأجي بفوت الـ Needle و بعمل جروح هتستفز
الـ Platelet عشان تروح تشتغل تشتغل و تتعالج هذا
الجروح اللي صار فإذا أنا طولت فعلاً هلاقي إن الـ
Platelet بدت تشتغل طب كيف أنا بعرف إن الـ أو يعني
إيش اللي يدلني إن الـ Platelet بدت تشتغل هتلاقيها
عامل Aggregation تجمعات لـ «Platelet» هذه وسيلة منها
عشان تعمل زي «plug» أو كتلة كبيرة وتبدأ تشتغل
وتفرز مواد ويعني لها شغل كثير أنه تسد الجروح أو
تسد القطع في الجلد اللي صار أو في النسيج اللي صار،
تمام؟ طيب، فبالتالي، لو أنا لقيت عدد لـ «Platelet»
قليل، أيش لازم أعمل؟ أول حاجة، أنا بشك أنه فيه
«Platelet Aggregation» أول حاجة بتحطها في بالي احتمال
«Platelet Aggregation» هو لنقص العدد، فإيش بدي أسويه؟
بترك العينة حوالي نص ساعة مع shaking خلال و أنا
بتركها يعني بترك العينة في مكان معين يعني خلال
الوقت هذا يكون بصير للعينة shaking أو إذا ما فيش
عندي جهاز يعمل shaking أنا كل شوية أعمل لها shaking
الوقت هذا كافي لو فيه blatant aggregation ينفك في
كثير أحيان بنفك لـ Platelet Aggregation من خلال أني
أترك العينة 20 دقيقة إلى 30 دقيقة طيب، برد بشتغلها
على الجهاز لو لقيت العينة النتيجة تحسنت معنى
الكلام أنه صح هي كان فيه Aggregation وانفك وهي
النتيجة وبصرفها لو لازالت لـ Platelet قليلة ضروري
قبل ما أطلع نتيجة الـ CPC أعمل Blood Film بعمل
blood film و بصبغه و بعد الـ Platelet من خلاله أول
حاجة بتطلع هل في في ال blood film Platelet
aggregates مش متفككة إذا في Platelet aggregates
دغري بطلب عينة جديدة بتكون هي السبب اللي قدت لنقص
عدد ال Platelets طيب لو ما فيش Platelet aggregates
بروح بعد الـ Estimated Count اللي تعلمناه في الـ
Blood Film إذا كنتم فاكرين بعد عشرة Field بجيب
المتوسط لإلهم و بضربه في 20 ألف بيطلع عندي عدد لـ
Platelets و الـ Count هذا كويس يعني ممتاز كثير
بنلاقيه مطابق للـ Count بتاع الجهاز و بقارن
النتيجة اللي طلعت معاها فعليًا مع نتيجة الجهاز إذا
كان في تطابق مابين النتيجتان خلاص بكون فعلاً ال
patient عنده thrombocytopenia نقص في البلاتلت عشان
هاتي زي ما بأكد أن البلاتلت من الحاجات الحساسة قبل
ما أطلع نتيجة بلاتلت قليلة هي قد إيش ال normal من
150 لـ 450 ألف من 150 ألف لـ 450 ألف إذا كان في عندنا
نقص في البلاتلت لازم أعمل كل الخطوات هذه قبل ما
أطلع نتيجة فيها بلاتلت عددها قليل تمام هاتي؟ طيب،
وجود Giant Platelets أحيانًا بيبقى فيه خلل معين
فيه الـ Hemobases في تصنيع الخلايا فبيصير زي ما
أنتم شايفين في الفيلم هذا في عندي Platelets كبيرة
هي هذه مثلًا Platelets اللي عليها المؤشر شايفينه؟
هي هذه Platelets حجمها قريب جدًا، هذه Platelets
حجمها قريب جدًا من حجم الـ RBCs هذه على إيش هتنعد؟
هتنعد على إنها RBCs، صح؟ طبعًا هذه هتأثر على الـ
count على Platelet هتنقص الـ count على Platelet ليش؟
لأنها مش هتنعد Platelet هتنعد على إنها RBCs الـ
Nucleated Red Cells Nucleated RBCs طبعًا إذا كنتم
فاكرين لما أخذنا الـ differential cell count حكينا
إن أحيانًا بيبقى في عندنا Nucleated RBCs والـ
Nucleated RBCs هذه بتعمل عندي نسبة خطأ لما أنا أعد
الخلايا من خلال الشامبر ليش؟ لأن هذه الـ
Nucleated RBCs ما بيصير لها الـ helices لأنها فيها نوى
مش زي باقي الخلايا و هتنعد على إنها White disease
في الشامبر فأنا لو فعلاً شفت الـ Nucleated RBCs في
الـ Blood Film أنا بحكي على الطريقة الـ Manual
يعني لو شفت فعلاً الـ Nucleated RBCs كان في عندنا
قانون نعمل فيه correction ونحسب العدد الحقيقي للـ
White BCs ويعني أني أستبعد أو أطرح منها لـ
Nucleated RBCs نفس الكلام بيصير عندي في الـ
Automated كيف؟ الآن إذا كنتم فاكرين في الشامبر
بتاع الـ White BCs إحنا كنا نكسر كل الـ RBCs لكن
لو فيه RBCs ما بتتكسر أو فيها نوى هذه الـ RBCs
هتنعد على إنها White BCs تمام؟ وهتعمل عندي نسبة خطأ
وهذه طبعًا تنعد على إنها الـ Lymphocyte لكن لاحظني
لحظة الجهاز بيعطيني إشارة في الـ histogram لما كان
يعني إذا في Nucleated RBCs بعرف بعرف إنه في
Nucleated RBCs وإذا فعلاً لقيت الـ White pieces
عالية ممكن يكون سببها وجود Nucleated RBCs طيب
هديك الأخطاء في الـ Count وفي الـ MCV هنا بقولك
بعض الأخطاء في Hemoglobin Measuring أي حاجة بتأثر
على قراءة الـ Spectrophotometry زي الـ Turbidity
ممكن تأثر على نتيجة الـ Hemoglobin زي مثلًا ارتفاع
عدد الـ White PCs لو كانت الـ White PCs عالية
هتعمل الـ Turbidity وتأثر على القراءة لو كان في
عندنا ليبيميا وجود لبد عالية في العينة لو كان عندنا بعض
أنواع الـ Hemoglobin اللي بتعمل Turbidity أو بتقوم
بال license زي Hemoglobin associate هذه برضه هتأثر
عندي على قراءة الـ Hemoglobin